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免疫親和柱的特點及條件優(yōu)化要怎么做

更新日期：2022-05-09 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：2910

　　免疫親和柱基于抗原抗體反應(yīng)，特異性抗體連接在柱體內(nèi)，選擇性吸附樣品中的待檢物，雜質(zhì)不被吸附，流出柱外，柱上結(jié)合的目標(biāo)物再被特定的洗脫液洗下來，可以用于液相色譜分析或者ELISA含量測定，是一種高效的前處理柱。

　　免疫親和柱的特點：

　　1、采用單克隆免疫技術(shù)，可以有效性地將待測成分分離出來，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強。

　　2、實驗穩(wěn)定性好，重復(fù)性強。

　　3、純化過程簡單快速，短時間即可處理大量樣品。

　　4、實驗設(shè)備輕便，自動化程度高，操作簡單，對實驗人員要求不高，可在小型試驗場所使用。

　　5、無需有毒溶劑，實驗過程安全可靠。

　　6、應(yīng)用范圍廣，可處理多種復(fù)雜樣品。

免疫親和柱

　　免疫親和柱的條件優(yōu)化要怎么做：

　　選擇小柱：根據(jù)基質(zhì)樣品和目標(biāo)物選擇合適的SP小柱。

　　活化平衡：活化溶液可以濕潤填料，滲透鍵合相，消除填料雜質(zhì)，通常和洗脫液一致平衡溶液一般和上樣液接近，從活化溶液過度到上樣液，減少上樣回收率損失。

　　上樣：將提取溶液加入到小柱上，一般需控制流速在1-2滴/秒。

　　淋洗：使用與上樣溶液相同或接近性質(zhì)的溶液沖洗不需要的雜質(zhì)。

　　洗脫：合適的洗脫溶劑將目標(biāo)物洗脫下來。

　　小貼士：

　　真菌毒素危害極大，應(yīng)戴手套操作。

　　不要使用過了有效日期的。

　　洗脫液可以直接使用色譜級甲醇洗脫，但可能會降低回收率。

　　多毒素檢測中，嘔吐毒素因為是水溶性，過柱操作時對有機溶劑耐受性低，所以組合中包含有嘔吐毒素的前處理方法會相應(yīng)復(fù)雜一些，前處理方法基本一致。